浙江农林大学考研，浙江农林大学考研分数线
责编 | 王一
真核细胞是由膜围绕的多种细胞器构成的区室化结构系统。细胞膜的分隔形成相对独立稳定且有特定功能的细胞器，从而提高了细胞内各种生理生化反应的效率。尽管细胞内pH稳态的调节对于细胞的生存至关重要，由于当前存在的技术障碍，对植物细胞器pH如何调控细胞的生物学功能研究仍然具有挑战性，主要的障碍存在于：（1）传统的pH测定技术是通过荧光染料来实现，这类方法很难避免对植物产生毒性；（2）由于荧光染料的亚细胞非特异锚定，针对参与分泌途径、胞吞和胞吐等高度动态过程中的pH动态无法精确定位分析。因而，目前对于植物细胞器pH的研究与了解仍然知之甚少。
2023年1月 5日，浙江农林大学沈锦波团队在 Trends in Plant Science 发表了题为 Live Measurement of Organelle pH by Plant pHluorins 的技术文章，系统阐述了植物pH传感器pHluorins的基本原理和实验流程，并提出了该技术在植物细胞囊泡运输、次生代谢、信号转导等交叉研究领域应用的具体方法，为进一步将该技术拓展到多维度热点研究领域提供了新思路。
植物优化表达的pH传感器pHluorins是一种无创实时跟踪特定细胞器pH的新型工具。其中，植物 PEpHluorin荧光强度随着环境变酸而变弱，而植物PRpHluorion （或RaVC） 允许在体内进行精确的pH测量。植物pHluorins具有以下优势：（1）植物pHluorins对高还原条件、高盐、过氧化氢等不敏感，保证了pH测定的准确性，并避免了每个细胞器pH校准的需要；（2）植物pHluorins荧光响应的线性范围涵盖植物细胞器pH值的范围。因此，它非常适合测量植物细胞器的pH变化；（3）植物pHluorins特异性响应荧光可以很容易地从植物组织的自发荧光中分离出来；（4）植物pHluorins可以瞬时表达，允许在没有基因转化平台的植物中进行细胞器pH测量。
因此，通过将特定细胞器的靶向序列融合到植物pHluorins，可以生成不同细胞器pH传感器。并且，利用细胞特异的启动子，在多种细胞类型的特定细胞器中对植物pHluorins表达进行遗传控制，允许观测pH梯度的空间特异性。最终，通过计算方法以高空间和时间分辨率监测pH动态变化规律。这使得能够对细胞内囊泡运输、次生代谢、信号转导之间的交叉作用中的细胞器pH响应机制进行深入探索。
浙江农林大学作为该论文的第一单位，沈锦波教授为第一作者和通讯作者，硕士生赵瑞为共同作者。该论文得到了国家自然科学基金、浙江省杰青项目等多项基金资助。
沈锦波教授于2013香港中文大学获得博士学位，并继续博士后研究工作。2018年进入浙江农林大学，入选国家青年拔尖人才、浙江省海外高层次人才、浙江省杰青项目等人才计划。综合细胞生物学、分子生物学、遗传学、蛋白质组学等技术方法，在模式植物、农林作物中重点研究植物囊泡运输过程在植物生长发育、逆境响应中的调控作用机理研究。在PNAS, Nature Communications, Molecular Plant, Plant Cell, Trends in Plant Science等发表一系列高水平论文。实验室欢迎海内外优秀青年人才加盟！
论文链接：
https://www.cell.com/trends/plant-science/fulltext/S1360-1385(22)00332-6
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