浙江农林大学考研，浙江农林大学考研分数线
随着人们生活水平的提高，糖尿病的发病率在世界范围内不断增长，已经成为继心脑血管疾病和癌症之后的人类第三大疾病，引起广泛关注。糖尿病病因多种多样，其中胰岛β细胞功能紊乱是引发糖尿病的关键原因。先前大量研究证明，异黄酮类化合物具有抑制胰岛β细胞凋亡、改善胰岛素分泌能力、增强胰岛β细胞功能的作用，对于预防糖尿病等代谢综合征有着极其重要的意义。
豆芋中异黄酮含量高达41.59 mg/g，是极佳的异黄酮来源。异黄酮具有抗氧化、抗癌、类雌激素、改善骨质疏松、预防代谢综合征等作用。浙江农林大学食品与健康学院的邓 珂、陈 镠、倪勤学*等在豆芋醇提物和乙酸乙酯萃取物的基础上探究豆芋异黄酮大孔树脂富集工艺，并对富集得到的异黄酮进行抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶抑制能力、RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用进行分析，以期为后续开发功能性食品提供理论依据。
1、大孔树脂富集豆芋异黄酮工艺的优化
树脂型号的筛选
01
由图1A可知，6 种大孔树脂中，D101和AB-8这两种型号的吸附率高于其他4 种树脂；而D101和DM130的解吸率优于其他4 种树脂。D101在吸附和解吸方面均优于其他5 种大孔树脂，因此选择D101树脂富集豆芋异黄酮。
样品质量浓度对吸附率的影响
02
如图1B所示，样品质量浓度增大时，吸附率亦随之逐渐增大；当质量浓度为1.5 mg/mL时，吸附率达到最大值（83.48%）；树脂吸附状态达到饱和，继续增大样品质量浓度，吸附率则逐渐下降。故最佳上样质量浓度为1.5 mg/mL。
乙醇体积分数对解吸作用的影响
03
如图1C所示，随着乙醇体积分数的增加，解吸率也逐渐增加；当乙醇体积分数达到80%时，解吸率达到最大值（80.61%）；当乙醇体积分数持续增加，解吸率开始下降，最后趋于平缓。这可能与洗脱剂极性有关，极性偏大或偏小都不利于异黄酮的洗脱，故最佳洗脱剂乙醇体积分数为80%。
洗脱体积对解吸作用的影响
04
由图1D可知，采用体积分数80%乙醇溶液、流速1.0 mL/min洗脱，解吸率随洗脱体积增大呈先上升后下降的趋势。在洗脱体积为80 mL时，解吸率达到最大值（84.63%）。当洗脱体积为120 mL时，流出液基本无色，说明吸附在D101树脂上的异黄酮类物质基本已被洗脱，故最佳洗脱体积为80 mL（4 倍柱体积）。
洗脱剂pH值对解吸作用的影响
05
由图1E可知，pH＜6时，解吸率随着pH值升高而逐渐增大；当pH 6时，解吸率达到最大值（80.14%）；继续增加pH值，吸附率逐渐下降。故最佳洗脱剂pH值为6。pH值过高或过低都不利于黄酮类化合物的吸附和解吸，这是因为黄酮类化合物存在形式随着pH值的改变而改变，或形成盐，或分子失去羟基上的H+以负离子形式存在，2 种存在方式都不利于大孔树脂的吸附。
2、 AI-3抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制作用
AEx、AEx-EtOAc及AI-3的抗氧化活性（对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基的IC50和FRAP）及α-葡萄糖苷酶抑制能力结果见表1。
3 、AI-3对RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用
氧化应激模型的建立
01
如图2所示，50～300 μmol/L H2O2损伤细胞1 h，细胞存活率显著下降（P＜0.05）。150、200 μmol/L H2O2细胞凋亡率接近50%，结合实验结果和细胞生长状态，本研究选用150 μmol/L H2O2处理细胞1 h建立RIN-m5F细胞氧化应激模型。
AI-3对RIN-m5F细胞增殖活力的影响
02
如图3所示，0～800 µg/mL AEx处理24 h后RIN-m5F细胞存活率与对照组相比无显著差异（P＞0.05），而1 600 µg/mL AEx处理24 h后RIN-m5F细胞存活率（81.58%）显著低于对照组（P＜0.05），表明在0～800 µg/mL为 AEx的安全作用质量浓度。而AEx-EtOAc、AI-3分别在0～400、0～300 µg/mL质量浓度范围内RIN-m5F细胞存活率与对照组相比无显著差异（P＞0.05），表明AEx-EtOAc、AI-3的安全作用质量浓度分别为0～400、0～300 µg/mL。
AI-3对RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用
03
如图4所示，AEx在安全作用质量浓度（0～800 µg/mL）范围内对RIN-m5F细胞存活率的影响同H2O2损伤组无显著差异（P＞0.05）；200～400 μg/mL AEx-EtOAc对RIN-m5F细胞存活率的影响同H2O2损伤组差异极显著（P＜0.01）；25～300 µg/mL AI-3组细胞存活率均极显著高于H2O2损伤组（P＜0.01），当AI-3达到安全作用质量浓度上限（300 µg/mL）时，细胞存活率达到最大，为84.19%，高于阳性对照组。
结论
综上所述，在优化条件下D101大孔树脂可有效富集豆芋异黄酮，所得组分AI-3具有较强的抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶抑制作用及RIN-m5F细胞氧化损伤保护作用。研究结果可为开发预防糖尿病等代谢综合征功能性食品提供理论依据。
通信作者简介
倪勤学副教授，浙江农林大学食品与健康学院。2004年获浙江农林大学农学学士学位；2006年获韩国国立庆北大学农学硕士学位；2013年获浙江大学生工与食品科学学院工学博士学位。2009年至今浙江农林大学教师。主要研究方向为农产品精深加工与综合利用，食品营养及健康产品的研究开发。近几年主持国家自然科学基金项目、省部级项目5项，以第一作者或通讯作者发表论文30余篇，获国家发明专利3项。指导学生获互联网+创业大赛国赛铜奖1项，挑战杯创业大赛省银奖2项。
第一作者简介
邓珂硕士研究生，浙江农林大学食品与健康学院。2019.09-2021.01，浙江农林大学，食品加工与安全， 获农学硕士学位。
本文《豆芋异黄酮的制备及其对RIN-m5F细胞氧化损伤的保护作用》来源于《食品科学》2022年43卷19期200-207页，作者：邓珂，陈镠，杨良缘，胡钰，许光治，张有做，王艳，倪勤学。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20210906-067。点击下方阅读原文即可查看文章相关信息。
图片来源于文章原文及摄图网。
Food Science of Animal Products（ISSN: 2958-4124, e-ISSN : 2958-3780）是一本国际同行评议、开放获取的期刊，由北京食品科学研究院、中国肉类食品综合研究中心主办，中国食品杂志社《食品科学》编辑团队运营，属于食品科学与技术学科，旨在报道动物源食品领域最新研究成果，涉及肉、水产、乳、蛋、动物内脏、食用昆虫等原料，研究内容包括食物原料品质、加工特性，营养成分、活性物质与人类健康的关系，产品风味及感官特性，加工或烹饪中有害物质的控制，产品保鲜、贮藏与包装，微生物及发酵，非法药物残留及食品安全检测，真实性鉴别，细胞培育肉，法规标准等。
投稿网址：
https://www.sciopen.com/journal/2958-4124
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